单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)为革兰阳性短小杆菌，不产芽孢，是一种人畜共患的病原菌，也是重要的食源性病原菌。其致病性强，老年人、孕妇、新生儿和免疫力低下者易感，感染后主要引起脑膜炎、菌血症、肺炎、急性胃肠炎和流产等疾病，临床表现缺少特异性。单核细胞增生李斯特菌感染病死率较高，可达30%~50%^[1-2]。美国疾病控制与预防中心(CDC)报告^[3]显示，美国每年约1 600人感染单核细胞增生李斯特菌，造成约260人死亡。我国报道病例多为孕妇与新生儿。一项研究^[4]汇总我国2000—2009年16个省报告的92例单核细胞增生李斯特菌感染病例，病死率达21%，其中新生儿的病死率高达56%。由于临床分离率较低，目前我国针对单核细胞增生李斯特菌的大规模研究相对较少，检出情况及耐药状况尚未明确。因此，为了解河北省单核细胞增生李斯特菌临床分布特征及耐药情况，本研究对2013年1月—2022年6月河北省细菌耐药监测网75所医院的单核细胞增生李斯特菌的临床情况进行回顾性分析，为临床治疗和感染控制提供参考。

1 资料与方法 1.1 菌株数据来源

收集2013年1月—2022年6月河北省细菌耐药监测网75所成员单位(包括32所二级医院，43所三级医院)检出的单核细胞增生李斯特菌菌株数据，剔除同一患者分离的重复菌株后纳入分析。

1.2 细菌鉴定及药敏试验

75所医院进行细菌鉴定及药敏试验使用的仪器包括：VITEK 2 (bioMérieux, France)、Phoenix 100(Becton Dickinson and Company, America)、MALDI-TOF(Bruker Corporation, Germany)等。使用全自动微生物鉴定系统鉴定细菌至种。按照美国临床实验室标准化协会(CLSI)M45要求进行药敏试验及质控，药敏试验所用培养基为添加2.5%~5.0%裂解马血的阳离子调节的MH培养基，质控菌株为肺炎链球菌ATCC 49619，结果判读标准参照CLSI M45、欧洲抗菌药物敏感性试验委员会(EUCAST)执行^[5-6]，判读标准为菌株的最小抑菌浓度(MIC)值大于折点值为耐药或非敏感，小于折点值为敏感。

1.3 年龄分组

参照全国细菌耐药监测网(China Antimicrobial Resistance Surveillance System，CARSS)分组标准^[7]和国际标准年龄分类临时指南^[8]，将患者分为新生儿(≤28 d)、儿童(29 d~14岁)、青年(15~47岁)、中年(48~64岁)、老年(≥65岁)五个年龄组分别进行统计分析。

1.4 统计学分析

应用WHONET 5.6软件和EXCEL进行数据整理、分析和绘图。

2 结果 2.1 单核细胞增生李斯特菌的时间分布

2013年1月—2022年6月河北省检出单核细胞增生李斯特菌共187株，其中，男性检出70株，女性检出117株。2013年检出数量最少(4株)，2021年检出数量最多(36株)，大体呈增长趋势，见图 1。

2.2 单核细胞增生李斯特菌的科室分布

检出菌株数量居前三位的科室依次为新生儿科(22.5%)、妇产科(21.9%)和血液内科(6.4%)。科室分布见表 1。

2.3 患者年龄分布

检出单核细胞增生李斯特菌数量居前三位的年龄组是青年(74株)、新生儿(39株)和中年(36株)人群，分别占39.6%、20.9%和19.2%，见表 2。

2.4 单核细胞增生李斯特菌的标本来源分布

检出菌株数量居前三位的标本分别是血(129株)、脑脊液(20株)和胃液(14株)，分别占69.0%、10.7%和7.5%，其他标本占比较少，见表 3。

2.5 单核细胞增生李斯特菌耐药情况

检出菌株对青霉素、氨苄西林、美罗培南、红霉素和复方磺胺甲唑的敏感率分别为97.8%、98.6%、98.0%、96.3%和98.4%，见表 4。其中，2株对青霉素非敏感，1株来源于2018年ICU病区49岁男性血标本，1株来源于2022年放疗科病区68岁女性血标本；1株对氨苄西林非敏感，与第1株青霉素非敏感菌来源于同一患者；1株对美罗培南非敏感，来源于2021年产科25岁女性血标本；1株对复方磺胺甲唑非敏感，来源于2013年67岁女性脑脊液；1株对红霉素耐药，来源于2020年感染疾病科22岁女性血标本。

3 讨论

本研究显示，2013年1月—2022年6月河北省单核细胞增生李斯特菌检出数整体呈上升趋势，与国内、外研究^[9-10]一致，上升原因与临床感染增加有关，还是与近年临床和实验室对该菌的重视度提高有关，尚需进一步研究。同时，仍需密切关注单核细胞增生李斯特菌的感染和检出情况，并进行持续监测。

科室分布的结果显示，新生儿科和妇产科检出单核细胞增生李斯特菌比例较高，共83株，占总体的44.4%；年龄分布结果显示，青年和新生儿检出比例较高，共113株，占总体的60.4%。文献^[4]指出，2000—2009年我国共报道92例李斯特菌病例，其中孕妇和新生儿占总数的58.6%。我国食源性疾病监测显示，2016年我国李斯特菌病主要以新生儿和孕妇为主^[8]，提示新生儿和孕妇可能为单核细胞增生李斯特菌的易感人群。李斯特菌为胞内寄生菌，致病物质主要是溶血素和菌体表面成分，细胞免疫是人体自我治愈李斯特菌病的重要机制^[4]。新生儿细胞免疫能力有限，而孕妇黄酮素升高时，细胞免疫能力下降^[11]，因此，这些可能是新生儿和孕妇容易感染李斯特菌的部分原因。此外，单核细胞增生李斯特菌也可穿透胎盘内皮细胞层感染胎儿^[12]。单核细胞增生李斯特菌容易存在于香肠类、生食蔬菜沙拉、冰激凌、未煮熟的鱼、巴氏杀菌牛奶和奶酪等食物中^[13]，因此，孕期应减少冷藏、冷冻食品的直接摄入，加强孕妇和新生儿单核细胞增生李斯特菌的检测，以预防该菌感染。

单核细胞增生李斯特菌检出率居前三位的标本为血、脑脊液和胃液，这符合单核细胞增生李斯特菌感染引起菌血症、中枢神经系统感染和发热性胃肠炎的特征^[14]，与郝民等^[3]研究结果基本一致，血(13/28，46.4%)、胎盘(8/28，28.6%)和脑脊液(4/28，14.3%)为单核细胞增生李斯特菌前三位的标本来源。1964—2013年感染该菌的新生儿病死率高达52.6%(40/76)，血流感染后病死率为28.6%(24/84)，中枢神经系统感染病死率为39.1%(36/92)^[15]。因此，临床需要提高对该菌的重视程度，尽早筛查；同时也要提升实验室对该菌的检测能力，提供快速准确的检测结果，有助于降低该菌感染的病死率。

单核细胞增生李斯特菌对头孢类抗生素天然耐药^[16]，能够用于该菌感染治疗的药物有限。因此，准确检测该菌的药敏结果至关重要。由于氨苄西林能穿透细胞膜，而青霉素类抗生素可以在细胞内稳定存在，因此，氨苄西林和青霉素对该菌杀伤性较强，治疗效果较好^[17-18]，常被用作治疗该菌所致感染的一线药物。本研究对2013年1月—2022年6月的耐药监测数据分析显示，该菌已经出现对青霉素、氨苄西林、美罗培南和复方磺胺甲唑的非敏感株。对青霉素、氨苄西林和复方磺胺甲唑非敏感率分别为2.2%、1.4%和1.6%，明显低于之前的研究^[19-22]，其中研究^[19-20]显示，青霉素非敏感率分别为71.0%(22/31)、50.0%(3/6)，氨苄西林的非敏感率分别为23.1%(3/13)、25.0%(1/4)，复方磺胺甲唑非敏感率分别为10.0%(2/20)、40.0%(2/5)。值得注意的是，本研究中该菌对美罗培南及红霉素的非敏感率高于国内一些学者的研究^[19-22]。本研究耐药结果与上述研究结果不同可能与地区用药有关，也可能与缺乏系统性研究有关，具体机制尚需进一步探讨。但是耐美罗培南的单核细胞增生李斯特菌并不常见，实验室需引起注意，复核确认后方可报告临床。

本研究数据来自多中心、长周期的观察结果，稳定可靠，对监测河北省单核细胞增生李斯特菌的特征有重要作用；但主要使用省内监测数据，且未能收集耐药菌株进行深入研究，具有一定局限性。

综上所述，2013—2022年河北省单核细胞增生李斯特菌主要分离人群为青年和新生儿，主要来自于血和脑脊液标本。虽然河北省抗菌药物使用逐渐规范化，但单核细胞增生李斯特菌仍然出现了非敏感菌株，因此，应持续监测该菌耐药性，并多中心收集非敏感菌株，深入探究其耐药机制，以指导临床预防和治疗。

利益冲突：所有作者均声明不存在利益冲突。