目的了解肠球菌属细菌菌种分布及耐药谱特点，为临床用药提供依据。方法对某院2013年1—12月各临床科室送检标本分离的441株肠球菌属细菌作回顾性分析。结果441株肠球菌属细菌，包括8个菌种，以屎肠球菌为主（占51.02%，225/441）, 粪肠球菌次之（38.55%、170/441)，其余菌种所占比率均＜3%。标本分布以体液为主（46.26%，204/441），其次为尿（32.88%，145/441）、痰（14.06%，62/441）。分离居前3位的科室依次为普通外科（107株，占24.26%），重症医学科（78株，占17.69%）和儿内科（31株，7.03%）。除四环素外，屎肠球菌对青霉素、氨苄西林、环丙沙星、左氧氟沙星、莫西沙星、红霉素、呋南妥因的耐药率均高粪肠球菌，差异均有统计学意义（均P＜0.01)。未发现耐万古霉素、利奈唑胺和替加环素的屎肠球菌和粪肠球菌。粪肠球菌对青霉素、氨苄西林、环丙沙星、左氧氟沙星、莫西沙星、呋南妥因耐药率均＜30%。除对奎奴普丁/达福普汀和呋南妥因的耐药率＜20%，屎肠球菌对其他抗菌药物的耐药率较高。结论不同种肠球菌属细菌对抗菌药物的耐药性存在差异，且多重耐药现象严重，应定期监测其细菌变迁和耐药性变化，指导临床合理用药。