目的了解开展医院感染知识培训对提高医务人员感染控制知识水平及手卫生依从性的作用。方法 2012年8月—2013年2月，对某院医务人员开展医院感染知识培训（采取讲课、现场指导和情景模拟相结合的方式），比较培训前后医务人员医院感染知识掌握情况和手卫生执行情况。结果培训前医务人员医院感染知识掌握合格率（46.08%,229/497）与培训后（95.77%，476/497）比较，差异有统计学意义（χ2=297.6，P＜0.001）。培训后医务人员无菌操作考试合格率显著高于培训前［（96.88%，62/64）vs（39.06%，25/64）；χ2=42.9，P＜0.001］；手卫生依从率显著高于培训前［（73.75%，177/240）vs（29.17%，70/240）；χ2=19.89，P＜0.01］，各洗手指征手卫生执行情况均显著提高（均P＜0.01）。结论理论培训结合现场指导和情景模拟的方式可以提高医务人员感染控制知识水平及手卫生依从性。