目的了解医务人员手卫生依从性实际情况，探讨改进观察模式和施行手卫生干预措施对医务人员手卫生依从性的影响。方法2014年4月—2015年12月对某院所有临床科室医务人员进行手卫生调查。其中2014年10月开始改进手卫生观察模式，采用直接观察法，观察人员由10名新入院实习生组成，分为10组交叉进行调查。2015年4月开始实施手卫生干预措施，分别比较改进观察模式前后和实施干预措施前后手卫生依从率。结果改进观察模式前（2014年4—9月）医务人员手卫生依从率为74.69%（484/648），改进观察模式后（2014年10月—2015年3月）医务人员手卫生依从率为65.63%（401/611）。观察模式改进前后医务人员手卫生依从率比较，差异有统计学意义（χ2=12.36，P＜0.01）。实施手卫生干预后（2015年4月—2015年12月），手卫生依从率提高至76.05%，高于干预前（2014年10月—2015年3月）的65.63%（χ2=24.78，P＜0.01）。医生的手卫生依从率由干预前的60.14%提高至干预后的71.12%，护士的手卫生依从率由干预前的70.79%提高至干预后的80.93%，差异均有统计学意义（χ2值分别为12.14、13.78，均P＜0.01）。结论改进观察模式可减少霍桑效应，获得手卫生依从性的真实水平，强化手卫生干预可有效提高医务人员手卫生依从性。